本发明属于三次采油技术领域,具体涉及一种快速构建生物表活剂与原油间超低界面张力的方法,所述的构建方法具体包括以下步骤:试验区块的现场取样及油水分离;试验区块原油等效烷烃数的测定;生物表面活性剂的选择;超低界面张力复配体系的构建;复配体系的性能评价。本发明所述方法能针对不同区块原油,快速构建生物表面活性剂复配体系,实现超低界面张力。本发明所述的构建方法具有方法简单、快速高效,减少试验的盲目性,提高了工作效率;本方法构建的复配体系具有界面张力低,驱油性能强的特点,界面张力低于10‑3mN/m,室内物模实验提高采收率大于25%。